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Investigadores brasileños prueban técnica que puede

Nov 26, 2023

Científicos de la Universidad Estatal de São Paulo reutilizaron un dispositivo ya utilizado para analizar células reproductivas bovinas para observar simultáneamente diferentes características del esperma humano

Fundación de Apoyo a la Investigación del Estado de São Paulo

imagen: Camila de Paula Freitas Dell'Aqua y Josiane de Lima Rosa, investigadoras de la UNESP y primeras coautoras de un artículo en Reproductive Toxicology que informa los resultados del estudiover más

Crédito: CERAN/UNESP y ReproTox

La citometría de flujo, una técnica basada en láser empleada para detectar y analizar las características químicas y físicas de las células o partículas, ya se usa ampliamente para la evaluación de la integridad del esperma animal y puede reutilizarse para analizar el esperma humano, especialmente para predecir la fertilidad masculina potencial más con precisión que los métodos tradicionales, según un artículopublicadoen la revista Toxicología Reproductiva.

El artículo es de investigadores de la Universidad Estatal de São Paulo (UNESP) en Brasil, quienes informan el primer uso exitoso de la citometría de flujo para el análisis funcional de los espermatozoides humanos. No hay precedentes en la literatura científica, afirman los autores.

El estudio implicó el uso de un citómetro, un dispositivo optoelectrónico equipado con láseres que excitan fluoróforos (compuestos químicos emisores de luz) y filtros que detectan fluorescencia en diferentes colores, con varias longitudes de onda correspondientes a características específicas de las células relacionadas con la fertilidad.

Usaron citometría de flujo para probar todo lo siguiente en una sola muestra: la integridad y estabilidad de la membrana plasmática del esperma, que es vital para su supervivencia en el tracto genital femenino y para su capacidad de fusionarse con el óvulo; el estado del acrosoma, la punta del espermatozoide que contiene enzimas que facilitan la penetración del óvulo; potencial mitocondrial, para producir la energía que impulsa el flagelo del espermatozoide a través del tracto genital femenino; y la producción en la matriz mitocondrial del anión superóxido, un compuesto oxidante necesario para que el espermatozoide se una al óvulo, pero dañino en exceso.

El recuento de espermatozoides humanos ha disminuido continuamente en las últimas décadas y esto, a su vez, ha influido en la caída de los nacimientos y la disminución de la tasa de fertilidad mundial. La evaluación clínica de estas células es la base fundamental tanto para identificar casos de infertilidad como para trabajar con tecnologías de reproducción asistida como la fecundación in vitro (FIV), en la que los óvulos de la mujer se fecundan fuera del cuerpo.

Un tipo de FIV consiste en la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI), en la que se selecciona un solo espermatozoide para inyectarlo directamente con una aguja microscópica en un óvulo maduro. El principal desafío es la dificultad de probar múltiples atributos simultáneamente en una sola celda para mejorar la precisión de la predicción de la fertilidad.

La última edición (2021) del manual de la Organización Mundial de la Salud sobre el examen y procesamiento del semen humano reconoce que el enfoque convencional para la evaluación de espermatozoides en un laboratorio clínico mediante espermiograma es incapaz de predecir con precisión el potencial de fertilidad masculina y que muchos casos siguen siendo idiopáticos (inexplicables). ).

"Puedes contar una pequeña cantidad de células, alrededor de 100 o 200 por muestra, bajo el microscopio, pero el número se eleva a por lo menos 20 000 cuando usas un citómetro de flujo. Puedes observar más de una parte de los espermatozoides al mismo tiempo , lo que hace que el análisis sea mucho más preciso como base para un tratamiento asertivo y específico", dijojosiane de lima rosa, primer autor del artículo junto aCamila de Paula Freitas Dell´Aqua . el estudio fueapoyado por la FAPESP.

"Los resultados de este estudio, sumados a la experiencia previa en medicina veterinaria en instalaciones que trabajan con semen bovino, presentan una nueva posibilidad para el uso de la citometría de flujo en los laboratorios de reproducción humana", dijo Dell'Aqua.

Para asegurarse de que el protocolo de análisis que desarrollaron pueda usarse ampliamente, los investigadores probaron dos tipos de citómetros en el estudio, uno más robusto con tres láseres (rojo, azul y violeta) y uno más simple con dos láseres.

Nuevas asociaciones

Además de desarrollar una técnica más eficaz para el análisis del potencial de fertilidad, el objetivo del estudio era fomentar el intercambio de información entre profesionales de la medicina humana y veterinaria para ayudar a desarrollar procedimientos novedosos.

“La medicina veterinaria requiere menos rigor bioético en la obtención de muestras y puede realizar más fácilmente ensayos en busca de herramientas alternativas. Esto se puede trasladar traslacionalmente a la medicina humana. Es fundamental combinar los dos campos para avanzar”, dijo.fabiana ferreira de souza, docente e investigadora del Departamento de Cirugía Veterinaria y Reproducción Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia (FMVZ) de la UNESP.

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Toxicología Reproductiva

10.1016/j.reprotox.2023.108353

Análisis de citometría de flujo múltiple para evaluar las características funcionales del esperma humano

18-feb-2023

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imagen: Camila de Paula Freitas Dell'Aqua y Josiane de Lima Rosa, investigadoras de la UNESP y primeras coautoras de un artículo en Reproductive Toxicology que informa los resultados del estudio publicado Josiane de Lima Rosa Camila de Paula Freitas Dell'Aqua apoyada por la FAPESP Nuevo alianzas Fabiana Ferreira de Souza Acerca de la Fundación São Paulo de Investigación (FAPESP) Aviso legal: